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---斑计数仪（elispot）的原理是什么呢

（一）原理：细胞受到---后局部产生细胞因子，被pvdf膜上特---单clone antibody捕获。细胞分解后，---斑计数仪，再与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。---p/nbt底物孵育后，pvdf膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。

（二）elispot与elisa的区别

1.elisa通过显色反应，在microplate reader上测定吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。

2.elispot通过显色反应，---斑计数仪报价，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数，1个斑点代表1个细胞，从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。

3.由于是单细胞水平检测，elispot比elisa和有限稀释法等更灵敏，能从20万～30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。

4.捕获antibody为高亲和力、高特---和低内toxin mcab，在研究者以---剂activation细胞时，不会影响活化细胞分泌细胞因子。

酶联斑elispot实验系统

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